MANUEL DU PRELEVEUR

La qualité du prélèvement de l'échantillon primaire conditionne la qualité du résultat de l'analyse biologique effectuée.

Les échantillons biologiques qui sont prélevés, identifiés, transportés ou prétraités de façon inadéquate sont susceptibles de conduire à des résultats erronés, à un diagnostic imprécis, à un traitement inapproprié ou à des risques de contamination.

Le manuel du préleveur est un document, élaboré par les laboratoires du pôle Biologies, il regroupe :

• Les informations nécessaires pour aider le préleveur à effectuer un prélèvement de qualité en vue d'obtenir un échantillon biologique conforme.
• Les consignes à respecter pour l'identification, la conservation et l'acheminement des échantillons biologiques vers le laboratoire.

Ce manuel permet de respecter les exigences auxquelles sont soumis officiellement :

• Les laboratoires du fait du référentiel GBEA (Guide de Bonne Exécution des Analyses en biologie médicale) et selon la norme d'accréditation ISO 15189.
• Les établissements de santé du fait des référentiels de certification de l'HAS (Haute Autorité en Santé).

Ce manuel est accessible, sous format électronique dans les laboratoires et via Clinicom pour les utilisateurs au niveau des services de soins intra-hospitaliers.

Le portail du CHU donne accès à une version WEB et à une version PDF (imprimable) pour les utilisateurs externes.

Toute correction, modification ou nouveauté entraînera une mise à jour du manuel en temps réel.

Le manuel fait partie de la structure documentaire du pôle Biologies, il sera révisé et mis à jour si nécessaire selon la « procédure annuelle de relecture des documents qualité » avec un changement de version. Des modifications mineures peuvent être enregistrées sans changement de version.

Echantillon biologique primaire: Partie du matériel humain, destinée à l'examen, la préparation, l'analyse et/ou le stockage. Souvent cette notion est également désignée par les termes « spécimen », « prélèvement » ou « pièces »

Echantillon biologique secondaire : partie issue du pré-traitement de l'échantillon primaire est destinée à l'analyse et/ou stockage

DASRI : Déchets d'Activité de Soins à Risques Infectieux

Le pôle Biologies Pathologies modifie les modalités pour joindre les laboratoires par téléphone

1) Microbiologie
- Du lundi au vendredi de 8h à 18h au 04 66 6(8 32 02)
- Le samedi de 7h à 16h au 04 66 6(8 31 02)
- A partir de 18h en semaine, le samedi après 16h, dimanche et jours fériés au 06 37 58 91 08

2) Biochimie et Biologie Moléculaire
- Du Lundi au Vendredi de 8h à 16h30 au 04 66 6(8 32 07)
- Du Lundi au Vendredi de 16h30 au lendemain 8h, le Samedi, le dimanche et jours fériés au 06 03 99 13 06

3) Hématologie
- Du lundi au vendredi de 8h à 16h et le samedi matin de 8h à 12h au 8 74 25 (ligne interne)
- Du lundi au vendredi de 16h au lendemain 8h, le samedi à partir de 12h et le dimanche et jours fériés au 07 72 15 86 18

4) Immunologie
Uniquement du lundi au vendredi de 8h à 16h au 04 66 6(8 36 26)

5) Cytogénétique et Cytologie Clinique
Uniquement du lundi au vendredi de 8h30 à 12h30 et de 13h30 à 16h30 au 04 66 6(8 41 60)

6) AMP
Uniquement du lundi au vendredi de 7h30 à 16h au 04 66 6(8 32 24)

-         Informer les correspondants internes et externes des conditions pré-analytiques nécessaires à la réalisation des prélèvements et des examens biologiques.

-         Prendre en charge la réalisation des prélèvements pour les patients externes.

-         Exécuter la prescription médicale, en son absence un formulaire spécifique doit être signé par le patient.

-         Réaliser les examens avec fiabilité et exactitude.

-         Valider les résultats.

-         Les Biologistes :

• peuvent donner, à la demande du patient, des commentaires concernant les résultats, le médecin prescripteur reste le seul interlocuteur pour les interpréter en fonction de la clinique et de la thérapeutique éventuelle.
• informent le médecin prescripteur des résultats pathologiques ou ayant un caractère d'urgence.

-         Transmettre les résultats aux patients et aux prescripteurs :

• Les résultats des patients hospitalisés sont disponibles dans les meilleurs délais sur le serveur des résultats, excepté pour certains examens  de génétique et d'anatomo-cyto-pathologie.
• Les résultats sont systématiquement transmis au prescripteur externe (sauf demande contraire) par envoi postal mais aussi par Fax sur demande explicite du prescripteur ou du patient et sous condition de vérification de l'identité du receveur.

• Les résultats sont transmis au patient externe par la poste; ils peuvent lui être remis en main propre  ou, à sa demande, à un tiers sous pli cacheté selon des modalités définies par le laboratoire.

• La communication téléphonique des résultats est limitée à certaines situations (résultats urgents, critiques, suivi de traitement, etc.) et nécessite une vérification d'identité
• Les résultats des examens concernant les patients mineurs, ceux demandés par la Médecine du Travail ou des compagnies d'assurances sont soumis à une réglementation précise, respectée par le Laboratoire.

Tout ceci par du personnel recruté selon les exigences réglementaires, habilité sur site après formation initiale complétée par une formation continue, le personnel est soumis aux règles d'éthique et de confidentialité liées à sa fonction.

La prescription des analyses, par la personne habilitée à le faire est le point départ de la phase pré-analytique. Les personnes autorisées à prescrire des examens de biologie médicale sont les médecins, les sages-femmes et les chirurgiens dentistes.

Le biologiste peut demander à son initiative certains examens définis à la nomenclature des actes de biologie médicale,  

L'ordonnance doit être rédigée par le prescripteur et doit mentionner :

• Le nom, les coordonnées et la signature du prescripteur.
• L'identification univoque du patient (son nom de famille, son premier prénom d'état civil, sa date de naissance et son sexe).
• La date
• Les examens à réaliser.
• En fonction des circonstances cliniques, les renseignements cliniques requis.

Les feuilles de demande utilisées dans les unités de soins sont spécifiques à chaque laboratoire exécutant, elles sont identifiées par le nom du laboratoire, une couleur et un code d'enregistrement. Ce sont des supports qui font partie de la structure documentaire et sont soumis à une mise à jour annuelle avec un changement de version.

Afin de s'assurer du choix du bon support, il est possible de consulter le guide des analyses à la page de l'analyse souhaitée.

Toute demande d'analyse, pour patient hospitalisé, doit être retranscrite sur la feuille de demande du laboratoire destinataire.

Les analyses urgentes sont demandées sur la feuille de prescription marquée « URGENT ».

Le préleveur doit :

- Coller dans le cadre(1) l'étiquette du patient en ayant pris soin de vérifier que les informations de l'étiquette correspondent au patient à prélever (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance, sexe) et au service prescripteur (code UF, nom du service).

- Remplir lisiblement :

• la date et l'heure du prélèvement dans les items prévus en (2)
• le numéro de téléphone du service demandeur en (3)
• le nom (en toute lettre) du préleveur (+ ou - la fonction) en (4)
• le nom du prescripteur en (5)

EN GENERAL

Le prescripteur peut demander oralement un rajout d'analyse(s) sur un échantillon utilisé au laboratoire pour un examen antérieur. Le laboratoire acceptera ou non la demande en fonction des conditions pré-analytiques et la quantité d'échantillon requises pour l'examen demandé.

Quelle que soit l'origine de la prescription (externe ou interne), la demande écrite du complément de prescription doit parvenir au laboratoire exécutant dans un deuxième temps.

EN PARTICULIER

Secteur Biochimie générale et d'urgence

De manière générale, les échantillons sont conservés après analyse 48H à +4°C.

Les ajouts d'analyse sont acceptés dans un délai de 8H après l'heure de prélèvement et  sous certaines conditions qui seront validées par le laboratoire :

                - avoir le tube de prélèvement adéquat

                - avoir respecté la température de transport de l'échantillon

                - prendre en  compte la stabilité du paramètre de l'échantillon

Selon le document SCHI012 Référentiel des analyses niveau 1 Prétraitement, conservation des échantillons mis à la disposition du personnel du laboratoire.

Secteur AMP

Voir avec les biologistes

Les autres secteurs du pôle biologies,

Un document dédié « SLAB024 Prétraitement et conservation des échantillons » précise le délai et la température de stockage des échantillons avant et après analyse. Ces informations sont mises à la disposition du personnel du laboratoire qui est en mesure de les communiquer au demandeur et d'accepter ou non le rajout au regard de ces dispositions.

• La diurèse si examen sur urines de 24H ou temps calculé
• La taille et le poids pour la clairance à la créatinine corrigée par rapport à la surface corporelle

Selon le cas, des informations peuvent aider à la validation biologique des résultats:

• Le nom et la posologie de l'anticoagulant pour les analyses d'hémostase.
• Le nom du médicament, la posologie, la date et l'heure de la dernière prise pour le dosage sérique d'un médicament.
• Date des dernières règles et traitement hormonal pour les dosages hormonaux.

Pour certains examens, des imprimés (fiche de renseignements, consentement du patient, etc.) à renseigner et à joindre à la demande sont indispensables à la réalisation de l'analyse.

Ces imprimés sont imprimables à partir de la page de l'examen au niveau du guide des analyses.

Si, toutefois, l'examen souhaité n'est pas répertorié au niveau du guide des analyses, il est indispensable d'appeler le laboratoire avant d'effectuer le prélèvement.

  Non-conformité pré-analytique

L'absence de document associé fera l'objet de l'enregistrement d'une non-conformité pré-analytique qui peut, selon le cas, aboutir à la non-réalisation de l'examen biologique demandé.

Urgences médicales

• Urgence absolue (ou urgence vitale)
  Cette situation est de survenue brutale et met en jeu la vie du patient en l'absence de soins rapides et adaptés.
  
  
• Urgence relative
  Il s'agit d'une situation grave, pouvant évoluer sans prise en charge adéquate vers une menace du pronostic vital à court ou moyen terme, ou une morbidité.

Urgence organisationnelle

Il s'agit de situations dans lesquelles le retour rapide des résultats d'examens facilite l'organisation de l'unité de soins (gestion des sorties et des flux, programmation d'examens d'imagerie, etc.) et donc optimise la prise en charge du patient.

Urgence biologique

Elle concerne des échantillons (prélèvements précieux) ou des analytes fragiles, dont la prise en charge technique doit être réalisée rapidement afin de garantir la qualité des résultats.
Cette notion est traduite au niveau du guide des analyses par un délai d'acheminement court (inférieur à 30 minutes)

• Utilisation du bon de prescription spécifique de couleur Orange
  Ou
• La mention « Urgent » est notée manuellement sur le support de prescription
  Ou
• Etiquette « URGENT » collée sur le sachet du bilan fait en prescription connectée

Les échantillons biologiques dans les vraies urgences médicales ne doivent pas être acheminés par pneumatique

• Signalement par l'agent acheminant le bilan qui doit le remettre en main propre à un personnel à l'accueil du laboratoire en précisant clairement la notion d'urgence.
  
  Pas de dépôt d'un bilan dit « URGENT » sans signalement au laboratoire
  
  

• La notion d'urgence peut-être apportée, à posteriori, oralement (téléphone) par le service (médecin ou IDE) si le prélèvement est déjà au laboratoire.

« Etre à jeun » se définit par un délai de 12 heures entre le dernier repas et la prise de sang. En général, pour des prélèvements effectués le matin.

Le laboratoire préconise d'être à jeun pour une prise de sang, car L'alimentation apporte elle-même certains éléments dosés. Dans ce cas, il est recommandé de prendre un repas léger et pauvre en matières grasses la veille au soir.

Signifie un jeûne de 3 à 4 heures entre le dernier repas et la prise de sang, après le repas la qualité de l'échantillon sanguin est modifiée (trouble, viscosité), ces modifications peuvent perturber le fonctionnement des appareils d'analyse ou gêner la lecture (recherche de cryoglobuline) et conduire à des résultats erronés.

Pour les prélèvements urgents : pas de conditions particulières.

Les exigences de jeûne et d'horaire sont détaillées par analyse dans le guide des analyses au niveau du paragraphe « Recommandations ».

Le respect de l'heure de prélèvement est primordial car :

• Pour la majeur partie des examens, les valeurs de référence ont été établies à jeun et au lever. Il est donc nécessaire de respecter ces conditions pour pouvoir comparer le résultat obtenu aux valeurs de référence et faire le suivi des résultats si le test est répété dans le temps.
• Certains paramètres varient naturellement en cours de journée (rythme circadien).
• Pour le dosage des médicaments, il est indispensable de respecter un certain délai entre le début du traitement et le moment du prélèvement (lorsque l'atteinte d'un état stable est nécessaire). Il convient également de s'assurer du délai nécessaire entre le prélèvement et la dernière administration du médicament lorsque l'on cherche à déterminer des concentrations à un temps précis (Concentration maximale = pic = quelques minutes après la dernière prise ou Concentration résiduelle = vallée = quelques minutes avant la prise suivante).
• Respect de période de repos pour le dosage de la prolactine.

Les exigences de jeûne et d'horaire sont détaillées par analyse dans le guide des analyses au niveau du paragraphe « Recommandations ».

Certaines analyses exigent un régime alimentaire particulier pendant une période déterminée précédant le prélèvement.

Le guide des analyses dans son paragraphe « recommandations » détaille le régime alimentaire à respecter quand cela est nécessaire.

Un prélèvement biologique est un acte de soins qui consiste à prélever un échantillon biologique en vue d'examen de biologie ou de diagnostic cytologique ou histologique.

Le but est de réaliser un prélèvement de qualité dans des conditions d'hygiène et de sécurité pour le patient et pour le personnel.

Parmi le personnel du laboratoire, les préleveurs autorisés sont

(1)    Titulaire de certificat de prélèvement sanguin

En se basant sur le principe selon lequel tout échantillon biologique est potentiellement infectieux, il est nécessaire de respecter des précautions de base lors de la manipulation de tout produit biologique (sang, liquides, tissus, etc.) de tous les patients, et de tous les matériels ayant été en contact avec un produit biologique, notamment :

• Porter un équipement de protection adapté aux diverses situations (gants, blouse, masque, lunettes, etc.)
• Se laver les mains avant et après chaque acte technique, les désinfecter ensuite en cas de souillure avec un produit biologique.
• Ne pas recapuchonner les aiguilles.
• Manipuler avec soins les objets coupants et piquants et les déposer immédiatement après usage dans des conteneurs adaptés.

Avant d'effectuer le prélèvement :

- Vérifier l'identité du patient : faire décliner et si possible faire épeler au patient: son nom, son prénom, +/- son nom de naissance, et sa date de naissance.

• Préleveur externe : s'assurer de la concordance entre l'identité complète du patient et celle portée sur l'ordonnance.
• Préleveurs hospitaliers : vérifier la concordance entre l'identité complète du patient, l'identité figurant sur le support de prescription et celle des étiquettes auto-collantes hospitalières.

(Dans la mesure ou le patient est dans l'incapacité de décliner son identité se reporter préférentiellement à un bracelet d'identification s'il existe)

- Recueillir les renseignements physiopathologiques, thérapeutiques et risque allergique (latex, etc.)

- S'assurer du respect des recommandations pré-analytiques requises pour la réalisation de l'analyse demandée (préparation particulière, état de jeûne, régime, etc.)

• Aiguilles.
• Tubes à prélèvements sous vide.
• Garrot.
• Coton.
• Chlorhexidine alcoolique à 0.5%.
• Pansements.
• Gel pour la désinfection des mains.
• Boîte récupératrice d'aiguilles, poubelle pour déchets contaminés et poubelle pour déchets non contaminés.

Le recueil de sang artériel pour les gaz du sang est généralement réalisé par ponction de l'artère radiale.

Le recueil du sang capillaire se fait à l'aide d'une lancette pour analyse immédiate par bandelette (glycémie) ou chez les enfants difficiles à piquer.

Le sang veineux est obtenu par ponction d'une veine à l'aide de matériel approprié pour analyse ou hémoculture.

Ne jamais piquer un bras:

• Avec un dispositif de perfusion en cours
• Avec un dispositif de fistule rénale (hémodialyse)
• Du côté du sein opéré chez une femme mammectomisée
• Du côté paralysé chez un hémiplégique
• Si dermatose

Une vigilance particulière sera portée aux personnes sous traitement anticoagulant ou qui souffrent de troubles de la coagulation.

Choisir le matériel de ponction en fonction de la qualité de la veine et du type de prélèvement à effectuer.

Seules les aiguilles de prélèvement de 19G à 22G sont autorisées pour les prélèvements destinés aux analyses d'hémostase.
Les aiguilles 23G sont acceptables pour l'hémostase uniquement en Pédiatrie.

Choisir les tubes de prélèvement en fonction de la prescription.

Les tubes peuvent être sans additif, avec ou sans gel séparateur, pour les analyses sur sérum ; ou avec un anticoagulant pour les analyses sur sang total ou plasma.

Le guide des analyses précise pour chaque examen le ou les matériel(s) adapté(s) à l'échantillon et à l'analyse souhaitée.

• Tous les tubes de type vacutainer™ sont sous vide, il ne faut en aucun cas les ouvrir.
  
• Le vide permet l'aspiration d'un volume de sang calculé pour respecter le ratio sang / anticoagulant.
  
• Chaque tube est identifiable par une couleur de bouchon et une étiquette spécifiques.
  
• Comme pour tout matériel stérile, la date de péremption des tubes doit être vérifiée et les tubes périmés doivent être éliminés.

Les tableaux qui suivent donnent une indication sur le nombre de tubes nécessaires ainsi que les associations d'examens possibles sur le même échantillon :

Un prélèvement veineux peut se faire sur tout le réseau veineux superficiel du pli du coude, de l'avant bras et du dos de la main.

Le garrot doit être posé à 7,5/10 cm au dessus du point de ponction, le pouls doit demeurer perceptible et le temps de pose du garrot ne doit pas dépasser 1 minute.

• Au-delà d'une minute de pose, la stase veineuse provoque une hémoconcentration.
• Lors de la recherche du site de ponction, si le garrot est posé depuis plus d'1 minute, le desserrer pendant 2 à 3 minutes et le remettre en place.
• Avec les tubes sous vide, dès que le sang afflue dans le tube, le garrot doit être desserré.
• Eliminer le garrot s'il est contaminé lors du prélèvement.

• Mettre des gants non stériles.
• Désinfecter largement le site de la ponction et laisser sécher avant de réaliser le prélèvement.
• Ne jamais palper le site de la poction après désinfection.
• Lors du prélèvement positionner le tube, étiquette vers le bas pour pouvoir visualiser l'arrivée du sang dans le tube.
• Veiller au bon remplissage des tubes.
• Il est recommandé d'homogénéiser, par plusieurs retournements lents, le tube dès le retrait du corps de prélèvement.
• Identifier les tubes.
• Veiller à respecter les conditions recommandées de prélèvement et de transport.

Effectuer le prélèvement des tubes selon l'ordre recommandé dans le tableau qui suit et veiller au bon remplissage des tubes

 *Recommandations pré-analytiques GEHT  (mise à jour mai 2017):  Place du tube de coagulation (tube CITRATE bouchon bleu) pendant les prélèvements sanguins :

  1)      Le tube de coagulation est prélevé en 2^ème position après un tube de "purge" (neutre sans additif) ou un tube sec (sans activateur de l'hémostase) ou après des hémocultures.
Lors des prélèvements avec une aiguille épicrânienne, le tube de purge est recommandé.

 2)      Le tube de coagulation peut être  prélevé  en 1^ère  position, si la ponction veineuse est franche et si le bilan ne comporte que le TP (TQ) notamment pour le suivi du traitement par AVK (INR)

 3)      le prélèvement est NON-CONFORME s'il est prélevé après un tube sec avec activateur ou contenant un anticoagulant autre que citrate ou CTAD.

Ces recommandations sont reprises dans Le support (SLAB110 Ordre de prélèvement des tubes)

  Tubes pédiatriques disponibles au CHU de Nîmes

- Tube pédiatrique Citrate , BD, réf. :363047

 - Tube pédiatrique EDTA , GREINER, réf.: 450547

 - Tube pédiatrique Héparine/gel/Ambré, BD, réf.: 365987

 - Tube pédiatrique Sérum/gel/Ambré, SARTSTEDT, réf.: 20.1344001

Recommandations de prélèvement en microméthode

Ordre de prélèvement des tubes en microméthode

En cas d'Accident avec Exposition au Sang suivre les recommandations institutionnelles

DEFINITION

Une hémolyse se produit lors de l'éclatement de la membrane des globules rouges et la libération dans le liquide extracellulaire (plasma ou sérum) des composants cellulaires.

L'hémoglobine des érythrocytes donne une couleur rouge au sérum ou au plasma visible à partir d'une concentration de 300 mg/l. L'intensité de la couleur rouge indique l'intensité de l'hémolyse.

+ ++++

LES CAUSES DE L'HEMOLYSE

Les erreurs suivantes peuvent entraîner une hémolyse et doivent être évitées :

1- Au moment du prélèvement

• Garrot trop serré.
• Aiguilles d'un diamètre trop petit.
• Aspiration de liquide tissulaire après la ponction veineuse.
• Transfert de sang à d'autres récipients à l'aide d'une seringue.
• Agitation de l'échantillon au lieu de mélanger doucement.

2- Pendant la conservation ou le transport

• Exposition à des températures trop élevées ou trop basses (contact avec des éléments réfrigérants).
• Délai d'acheminement trop long et séparation des cellules du sérum ou plasma après plus de 3 heures

3- Au laboratoire

• Centrifugation trop longue ou trop forte.
• Congélation de sang total

LES EFFETS DE L'HEMOLYSE 

1. La libération de composants intracellulaires modifie leur concentration dans le sérum ou le plasma.
2. La coloration rouge causée par l'hémoglobine interfère avec les mesures photométriques.
3. Les réactions chimiques qui se déroulent au cours des analyses peuvent être influencées par des substances cellulaires. 

 Pour les demandes d'analyses dont les résultats risquent d'être impactés par l'hémolyse, le laboratoire écartera les échantillons hémolysés et ne réalisera pas les examens.

Contacter le laboratoire de Biochimie

• Le Patient doit être à jeun de 12 heures ou en jeûne lipidique d'au moins 4 heures
  
• Le matériel de prélèvement spécial (boîte isotherme contenant 3 tubes secs, une aiguille et un corps de pompe dans un sac plastique contenant 3 packs de gel eutectique, le tout maintenu à 37°C) est fourni par le laboratoire à la demande de l'unité de soin.
• Avant 11 H, du lundi au vendredi et en dehors des jours fériés.
• Le temps écoulé entre le départ de la boîte du laboratoire et son retour avec le prélèvement du service ne doit pas dépasser 30 minutes. 

1. Se laver les mains au savon.

2. Faire une toilette intime minutieuse (méat urinaire) avec un antiseptique

3. Ouvrez le pot de recueil stérile:

•    Pot à couvercle bleu avec adaptateur pour tubes vacutainers:
• ne pas soulever l'étiquette
• ne pas toucher la canule intégrée
• ne pas toucher l'intérieur du couvercle
• Pot à bouchon rouge (ne pas toucher l'intérieur du couvercle)
                  

4. Uriner le premier jet dans les toilettes.

5. recueillir le 2ème jet d'urine dans le flacon stérile, le refermer immédiatement (volume minimum 10 ml).

6. Apporterle flacon au laboratoire le plus rapidement possible (moins de 2h ), 1 conservation possible 24h entre 2-8°C.

1. Le matin au lever, uriner aux toilettes (jeter les urines).

2. Noter l'heure.

3. Jusqu'au lendemain matin, même heure, recueillir toutes les urines des 24 heures dans le flacon remis par le laboratoire 

4. Pendant la durée du recueil, conserver le flacon entre 2-8°C.

5. A la fin du recueil, apporter le flacon au laboratoire.

1. Recueillir les urines de 22H à 6H du matin dans le flacon donné par le laboratoire

2. A la fin du recueil, apporter le flacon au laboratoire.

1. Homogénéiser les urines
2. Retirer l'étiquette de protection (ne pas la jeter).
3. Insérer le tube (sans additif  puis avec additif  ) dans l'orifice et le percuter.
4. Le maintenir en position jusqu'à ce que le remplissage s'arrête. veiller à remplir le tube jusqu'au repère de remplissage minimum indiqué sur l'étiquette.
5. Homogénéiser par 8 à 10 retournements.
6. Durée de conservation : 48 heures à température ambiante (sauf pour les gonocoques : 24 heures)

1. Mesurer le volume total d'urines recueillies sur 24h (noter diurèse).
2. Plonger la canule dans le flacon contenant les urines de 24h.
3. Insérer le tube à urines sans additif  (tube de chimie) et le percuter  
4. Attendre le remplissage complet du tube et le retirer.
5. Identifier le tube et indiquer le volume total des urines recueillies sur 24h sur la feuille de demande d'analyses.
6. Transmettre le tube au laboratoire, à température ambiante, dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses).

1. Maintenir la poche contenant les urines verticalement et y plonger la canule de transfert.
2. Avec une main, maintenir la canule en place.
3. De l'autre main, introduire à fond le tube dans le corps de la canule.
4. Attendre le remplissage complet du tube. veiller à remplir le tube jusqu'au repère de remplissage minimum indiqué sur l'étiquette.
5. Homogénéiser l'échantillon par 8 à 10 retournements du tube.
6. Identifier le tube et le transmettre au laboratoire dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses).

1. Clamper la tubulure (A) 
2. Vérifier la quantité d'urine présente dans la tubulure.
3. Désinfecter le site de prélèvement de la sonde (B) selon le protocole recommandé.
4. Percuter le site avec l'aiguille ou avec l'adaptateur (selon la nature du site).
5. Insérer les tubes et les percuter selon l'ordre recommandé ( puis )
6. Maintenir le tube en position jusqu'à ce que le remplissage soit complet, veiller à remplir le tube jusqu'au repère de remplissage minimum indiqué sur l'étiquette.
7. Homogénéiser les tubes par 8 à 10 retournements.
8. Identifier les échantillons et les transmettre au laboratoire, à température ambiante, dans les meilleurs délais (voir le guide des analyses).

Ce chapitre présente les recommandations générales avant prélèvement et les modalités de recueil du prélèvement pour tout examen de selles. Les conditions préanalytiques précises (température de conservation, durée du recueil, quantité de prélèvement, etc.) pour chaque type d'examen de selles doivent être consultées sur le guide des analyses.

Les recommandations avant prélèvement

• Eviter la consommation d'oléagineux les 2 jours précédant le recueil et les 3 jours du recueil, ainsi que les laxatifs durant la même période.
• Eviter chez les enfants le recueil sur couches, car la déshydratation entraîne un tableau de fausse constipation : préférer un recueil sur une poche
• Pour le dosage de stéatorrhée (recherche de graisses dans les selles) un régime surchargé en graisses peut être demandé au patient
• Faire des recueils avant une investigation par imagerie ou au moins 1 semaine après.
• Pour une recherche de sang dans les selles, le prélèvement ne doit pas être effectué pendant la période des règles ou si le patient souffre de saignement hémorroïdal ou urinaire. Pendant les 48h précédant le recueil, le patient doit éviter de consommer des substances qui peuvent causer des irritations gastro-intestinales et provoquer un saignement occulte (alcool, aspirine ou certains médicaments)   

Les modalités de prélèvement et de conservation

• Pour les analyses nécessitant un recueil sur 24h (Clairance alpha1 antitrypsine, Fécalogramme, recherche de laxatifs, Stéatorrhées, Créatorrhées, ionogramme), le recueil de la totalité des selles s'effectue dans un récipient sec (pot à selles d'1 litre) différent pour chacune des journées (si recueil sur 3 jours) et sans contact urinaire. La conservation avant acheminement au laboratoire de biochimie est réalisée à +4°C.
• Pour les analyses nécessitant un simple échantillon (Calprotectine, Elastase, Porphyrines, sang dans les selles) tout en respectant les masses minimales recommandées dans le guide des analyses, un flacon non stérile, propre et sec de 40 mL à bouchon blanc est utilisé. La conservation avant acheminement au laboratoire de biochimie est réalisée à +4°C. Mettre à l'abri de la lumière pour le dosage des porphyrines.

•  Prélever avant le début de l'antibiothérapie si possible, sinon prévenir le laboratoire de l'antibiothérapie en cours.
• Fournir les renseignements cliniques.
• Préciser au mieux la demande d'examen: demande explicite pour la recherche d'agents infectieux particuliers, nature et localisation précise de l'échantillon.
• Si plusieurs échantillons, numéroter et identifier précisément les échantillons (sur flacons / écouvillons et sur le bon de demande).
• Réalisation du prélèvement:
  • Se laver les mains.
  • Mettre des gants à usage unique (non stériles ou stérile en fonction du prélèvement).
  • Porter un masque à usage unique si risque d'inhalation d'agents pathogènes.

Flacons BioMérieux : aérobie (bouchon vert)   et anaérobie (bouchon orange)  

• Conditions d'asepsie rigoureuses.
• Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++
• Remplir d'abord le flacon aérobie PUIS le flacon anaérobie, et éventuellement les autres tubes de sang ensuite.
• Volume de sang recommandé par flacon: 8-10 ml.

Flacon BioMérieux pédiatrique (bouchon jaune)  

• Conditions d'asepsie rigoureuses
• Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++
• Volume de sang recommandé par flacon: selon le poids de l'enfant, se reporter au tableau dans le visuel ci-dessous
• Avant le prélèvement, mettre un trait sur le flacon pédiatrique = limite du volume de sang à prélever

MATERIEL

Flacon BD BACTEC mycobactéries (bouchon rouge) 

 MODE DE PRELEVEMENT

Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN  (IBAC050 "Prélèvement pour hémoculture pour patient > 35Kg") et le chap. 6.4.4 Prélèvements veineux du présent manuel.

Points importants :

• Conditions d'asepsie rigoureuses.
• Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++.
• Volume de sang recommandé par flacon: 5 ml.
• ATTENTION: Une quantité trop faible ou trop importante de sang fausse le résultat.

 MATERIEL

Flacons BD BACTEC :    MYCOSIS (disponible au laboratoire)   

MODE DE PRELEVEMENT

Cf. Instruction institutionnelle validée par le CLIN  (IBAC050 "Prélèvement pour hémoculture pour patient > 35Kg")  et le chapitre 6.4.4 Prélèvements veineux du présent manuel.

Points importants:

• Conditions d'asepsie rigoureuses.
• Désinfection du bouchon du flacon avant de prélever +++
• Remplir d'abord le flacon aérobie PUIS le flacon anaérobie, et éventuellement les autres tubes de sang ensuite.
• Volume de sang recommandé par flacon: 8-10 ml (min 5 ml).
• ATTENTION: Une quantité trop faible ou trop importante de sang fausse le résultat.
  

 MATERIEL

Cf. chapitre 6.7 Recueils d'urine du présent manuel  

MODE DE PRELEVEMENT

• Recherche effectuée uniquement si premier ECBU négatif avec leucocyturie > ou égale à 20 000/ml.
• La recherche s'effectue sur la totalité des urines du matin après restriction hydrique et pendant 3 jours consécutifs.

MATERIEL

MODE DE PRELEVEMENT

Recherche des œufs de schistosomes (bilharzies) dans les urines de 24h ou de préférence la 1ère miction matinale après un effort physique.

• Se laver les mains.
• Mettre des gants (non stériles, à usage unique).
• Sortir l'écouvillon stérile de son emballage en le saisissant par le bouchon à l'extrémité de la tige sans la toucher.
• En cas de lésion sèche, humecter l'écouvillon d'un peu de sérum physiologique stérile en dosette unitaire (1 à 2 gouttes).
• Prélever d'une main « ferme » en faisant tourner l'écouvillon pour charger toute la surface.
• Utilisation d'un écouvillon avec milieu de transport liquide (tube bouchon violet): casser l'extrémité de l'écouvillon dans le tube contenant le milieu liquide (cf schéma ci-dessous) et étiqueter soigneusement.
• Si utilisation d'un écouvillon sec (sans milieu de transport), replacer l'écouvillon dans son étui d'origine et acheminement urgent au laboratoire ++ (moins de 2h) : à éviter en bactériologie.

Ecouvillon sans milieu de transport	Ecouvillon avec milieu de transport liquide

• Prélèvement réalisé par médecin habilité
• Prélever avant début de antibiothérapie si possible, sinon prévenir le laboratoire de antibiothérapie en cours.
• Avant ponction, antisepsie de type chirurgical.
• Fermer hermétiquement les flacons pour le transport au laboratoire.
• Acheminement urgent au laboratoire +++

Voir la documentation hospitalière sur les DASRI

art. R 1335-2 du Code de Santé publique « Toute personne qui produit des DASRI est tenue de les éliminer »

• La législation contraint les patients produisant des déchets de soin piquants ou coupants à les jeter dans une boîte spécifique.
• Ces boîtes sont disponibles au niveau des pharmacies depuis le 1er novembre 2011. 
• Il est formellement interdit d'utiliser d'autres récipients (boîtes de conserve, bouteilles en verre ou en plastique...) sous peine d'amende ou d'emprisonnement, notamment en cas d'accident des agents de tri.
• Ne pas remplir le collecteur au-delà du trait supérieur et le fermer définitivement avant élimination au niveau d'une borne de récupération des DASRI. Le délai de stockage ne doit pas dépasser 3 mois. Ranger les boîtes jaunes hors de portée des enfants.

L'identification des échantillons doit être effectuée par le préleveur au moment du prélèvement.

Décret n° 2002-660 du 30 avril 2002, Art. 20-5 :

« Les prélèvements destinés à être transmis à un laboratoire de biologie médicale effectués par les professionnels de santé, y compris ceux exerçant au sein des établissements et des centres de santé ne disposant pas de laboratoire d'analyses de biologie médicale, doivent être parfaitement identifiés. Ils le sont par le nom patronymique, le nom marital ou usuel, le prénom, la date de naissance et le sexe du patient, mentionnés par le professionnel de santé au moment du prélèvement. Ce dernier spécifie son nom et précise la date et l'heure du prélèvement. »

L'enregistrement du patient hospitalisé permet l'édition d'étiquettes à code-barres portant l'identification complète et univoque du patient (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe), son statut en tant qu'hospitalisé (H) ainsi que son unité d'hospitalisation.

L'enregistrement du patient au bureau des entrées, avant son arrivée à l'office de prélèvements du laboratoire ou dans les unités de consultations hospitalières, permet l'édition d'une planche d'étiquettes à code-barres portant l'identification complète et univoque du patient (nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe), son statut en tant qu'externe (E ou E+) ainsi que son unité de consultation.

Le préleveur peut être le patient lui-même, les infirmiers libéraux, les centres de soins, les offices de santé, etc.

Les échantillons peuvent être identifiés de façon manuscrite ou à l'aide d'étiquettes auto-collantes.

Les informations obligatoires qui doivent figurer sur les échantillons et sur la fiche de transmission sont: nom, prénom, nom de jeune fille, date de naissance et sexe.

L'étiquette hospitalière sera collée à postériori sur l'échantillon au niveau du laboratoire.

L'enregistrement du dossier dans le SIL (système informatique du laboratoire) engendre l'édition d'étiquettes à code-barres avec l'identité complète du patient et les numéros internes du dossier et des échantillons.

Quels que soient la nature et le site du prélèvement, le préleveur doit noter sur le support de prescription toute difficulté ou incident rencontrés lors de la réalisation du prélèvement.

Le tableau suivant présente les mesures à prendre concernant le patient en cas d'incident de prélèvement.

• Par le préleveur du CHU (unités de soins, office de prélèvements)

Pour chaque patient prélevé et pour chaque laboratoire destinataire au sein du CHU, les contenants d'échantillons biologiques identifiés sont mis dans un sachet en plastique étanche muni d'une poche kangourou pour le support de prescription afin d'éviter la contamination du document par l'échantillon biologique en cas de fuite.

• Par le coursier, pour le transport à l'intérieur du site Caremeau

Les poches Kangourou contenant les échantillons biologiques sont mises dans des mallettes isothermes qui respectent l'intégrité des contenants, la confidentialité et la température de transport préconisée pour les échantillons.

Les malettes isothermes sont maintenues propres et désinfectées

• Par le coursier, pour le transport routier inter-établissements du CHU

-       Lorsque le conditionnement primaire a satisfait aux essais d'étanchéité sous une dépression appliquée de 95kPa (tous les tubes vacutainer fournis par BD), les poches Kangourou contenant les échantillons biologiques ainsi que les supports de prescription sont mises directement dans les mallettes isothermes sérigraphiées UN3373.

-       Lorsque l'échantillon est contenu dans un conditionnement primaire étanche mais non résistant à 95kPa (matériel hors tubes vacutainer fournis par BD), les poches Kangourou contenant les échantillons biologiques et les supports de prescription sont mises dans des boîtes rigides contenant de l'absorbant. Ces boîtes sont ensuite placées dans les mallettes isothermes sérigraphiées UN3373.

Les malettes isothermes sont maintenues propres et désinfectées et doivent être systématiquement refermées après chaque ajout d'échantillon(s).

• Par le laboratoire du CHU pour les analyses expédiées

Le conditionnement des échantillons est décrit dans le MOLAB036 Gestion des envois d'analyses par les laboratoires utilisateurs de Glims.

Les secteurs non utilisateurs de Glims ont des documents spécifiques qui décrivent le conditionnement des échantillons biologiques basé sur le respect de la réglementation ADR.

• Par le laboratoire demandeur

Le conditionnement des échantillons envoyés par un laboratoire extérieur (privé ou au sein d'un établissement hospitalier) est sous la responsabilité du laboratoire expéditeur.

 non conformité pré-analytique associée

Le non-respect des règles de conditionnement et de l'intégrité de l'emballage des échantillons biologiques.

Le guide des analyses définit le délai de transmission spécifique à chaque analyse.

Le délai de transmission des échantillons au laboratoire comprend le délai de conservation dans le service de soin et le délai d'acheminement vers le laboratoire

Pour un examen donné, lorsque le délai de conservation et d'acheminement est très court et donc incompatible avec un transport trop long, il est signifié dans le guide des analyses que le prélèvement doit être effectué au laboratoire.

• La conservation des échantillons dans les services de soins avant l'acheminement vers le laboratoire

Les prélèvements d'échantillons biologiques effectués dans le matériel de recueil spécifique (tubes, pots, écouvillon, etc.) sont acheminés le plus rapidement possible vers le laboratoire. Si pour des raisons de logistique, le prélèvement doit être conservé dans l'unité de soins, ce stockage doit être bref et à température ambiante sauf mention spécifique dans le guide des analyses.

• L'acheminement des échantillons vers le laboratoire

Les circuits et horaires de collecte et de transport des échantillons biologiques des sites externes du CHU vers le laboratoire permettent d'assurer une durée de transport minimisée. Ils sont définis dans le document (SLAB039 Circuits et horaires du transport des échantillons biologiques) disponible sur Exlibris. Afin d'optimiser le délai de transmission, les préleveurs doivent tenir compte des horaires de passage des coursiers pour effectuer les prélèvements.

La température indiquée dans le guide des analyses de façon spécifique pour chaque analyse correspond à la température de conservation et de transport de l'échantillon vers le laboratoire.

Afin d'éviter toute variation de température, les échantillons sont transportés vers le laboratoire dans un sac isotherme.

Pour le transport inter-établissements, la maîtrise de la température des véhicules permet  de garantir les conditions de température ambiante adéquates.

Le rajout de gels eutectiques froids dans la mallette de transport permet de respecter les conditions de température réfrigérée (5°C +/- 3°C) recommandée pour certains échantillons. 

Le non-respect des conditions de température et de délais de transmission des échantillons biologiques fera l'objet de l'enregistrement d'une non-conformité pré-analytique qui peut, selon le cas, aboutir à la non-réalisation de l'examen biologique demandé.

Système INTRA-CHU

Système ICG-CHU

• Ne pas se servir du pneumatique:
  • En cas d'urgence vitale
  • En cas de prélèvement précieux
  • Pour le transport des échantillons biologiques destinés au laboratoire de Microbiologie.
  • Pour le transport des échantillons biologiques prélevés sur tube citratés destinés à l'exploration des fonctions plaquettaires.
  • Pour l'acheminement des tubes STRECK destinés aux DPNI des trisomies
• Veiller à ce que les contenants des échantillons biologiques soient correctement fermés pour éviter toute fuite.
• Veiller à ce que les contenants des échantillons biologiques soient bien calés dans la cartouche pour éviter la casse.

Le système ne fonctionne pas en cas de coupure électrique ou de panne.

En cas de panne du système, contacter la centrale d'appel au 84141 (de 8h à 12h et de 13h à 16h30). En dehors de ces horaires, joindre le PC incendie au 84092.

Lors d'un dysfonctionnement, l'acheminement des échantillons est assuré par :

• les coursiers depuis les unités de soins,
• les IDE pour les prélèvements émanant du centre de prélèvement.

• Transport interne (transport pédestre)

Par les agents de certains services ou par des coursiers.

Les horaires et les circuits de ramassage par les coursiers sont gérés par le service intérieur.

•  Transport routier inter-établissements du CHU

Les échantillons biologiques font partie de la classe 6.2 Matières infectieuses de la classification de l'ONU.

La réglementation ADR (Accord européen relatif au transport international des marchandises Dangereuses par Route) s'inscrit dans une logique de prévention des accidents.

L'acheminement des prélèvements biologiques doit respecter l'obligation réglementaire du triple emballage.

Les circuits et horaires du transport des échantillons des sites externes du CHU sont gérés par le service intérieur.

Le délai de rendu des résultats correspond au délai de réalisation de l'analyse après réception de l'échantillon au laboratoire.

 Il est défini de façon spécifique par analyse au niveau du guide des analyses.

 Les résultats des examens urgents sont rendus dans un délai qui tient compte de celui indiqué dans le document "SLAB026 Liste des examens urgents libérés après validation" augmenté du délai d'acheminement